在使用計數(shù)板時,如何避免誤差和污染?
2025-01-08 來自: 新鄉(xiāng)市紅旗區(qū)天健教學設備有限公司 瀏覽次數(shù):165
在使用計數(shù)板進行細胞或微生物計數(shù)時,避免誤差和污染是至關重要的。以下是一些具體的措施和建議:
避免誤差
確保計數(shù)板清潔無劃痕:
在每次使用前,應檢查計數(shù)板是否清潔,無劃痕或污物。
如若發(fā)現(xiàn)計數(shù)室有污物,需按要求清洗并吹干后再進行實驗。
計數(shù)板、血蓋片、微量吸管及刻度吸管的規(guī)格應符合要求或經(jīng)過校正。
規(guī)范操作:
嚴格按照操作規(guī)程進行,如先蓋血蓋片后加菌液,確保菌液分布均勻,無氣泡產(chǎn)生。
在菌懸液搖勻后,應先在計數(shù)板上蓋上血蓋片,再用滴管吸取少許菌懸液,從計數(shù)區(qū)中間平臺沿血蓋片的上邊緣滴入一小滴菌懸液,利用液體的表面張力一次性充滿計數(shù)區(qū)。
避免先加菌液再覆蓋血蓋片,防止因菌液加入過多導致血蓋片未與計數(shù)板支持柱接觸,或產(chǎn)生氣泡而影響計數(shù)準確性。
提高計數(shù)準確性:
選擇多個區(qū)域進行計數(shù),然后取平均值,以提高計數(shù)的準確性。
優(yōu)先選擇細胞分布均勻的區(qū)域進行計數(shù),避開邊緣區(qū)域和細胞過于密集或稀疏的區(qū)域。
只計數(shù)完整的細胞,對于破碎的細胞、細胞碎片和雜質(zhì)應不予計數(shù)。
對于壓線的細胞,通常采用“計上不計下,計左不計右”的原則,避免重復計數(shù)。
縮小計數(shù)域誤差:
計數(shù)域誤差是由于細胞在計數(shù)室內(nèi)呈隨機分布,所能計數(shù)的細胞分布范圍有限而產(chǎn)生的。
通過擴大計數(shù)范圍和計數(shù)數(shù)目,可以縮小這種誤差。例如,在計數(shù)前進行誤差估計,然后決定所需計數(shù)的數(shù)目和計數(shù)范圍。
避免污染
無菌操作:
在整個操作過程中,應嚴格遵守無菌操作原則,防止外部微生物污染樣本。
使用無菌器材和試劑,確保實驗環(huán)境的清潔和無菌。
防止交叉污染:
在處理不同樣本時,應使用不同的器材和試劑,避免交叉污染。
及時更換使用過的器材和試劑,防止污染擴散。
樣本保存:
樣本應妥善保存,避免長時間暴露在空氣中或受到其他污染源的污染。
樣本應在適當?shù)臏囟群蜐穸葪l件下保存,以確保其穩(wěn)定性和準確性。